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羟胺非常盐类常用作大王人有机和无机反应中的收复剂。它们还不错行为脂肪酸的抗氧化剂；用于制备肟，一个进军的官能团。它亦然生物硝化作用的中间体。

羟胺对呼吸系统、皮肤、眼部及黏膜具刺激性，吞食无益，为潜在的诱变剂。

据报谈，盐酸羟胺在小鼠淋巴瘤 tk 突变测定中具有诱变性，有和莫得代谢激活，但数据并弗成令东谈主折服地自满该测定中阳性效果的最新轨范。以为羟胺通过具有阈值的作用样式（即脾含铁血黄素千里着症）指点肿瘤。在血管赘瘤的 ≥ 5 ppm 或 0.2 mg/kg/天的雄性大鼠和高剂量 80 ppm 或 6.2 mg/kg/天的雌性大鼠（血管赘瘤和血管瘤）中不雅察到肿瘤加多。通过参考现存文件，ICH M7（R1） - 法子-2得出论断，在 2 年大鼠商酌中不雅察到的最低不良反应水平 （LOAEL） 为雄性 0.2 mg/kg/天，阐明这个 NOEL 值，羟胺的终身 PDE 为 2μg/天。

文件一经报谈了几种测定羟胺的分析时刻。这些方法包括分光光度法、转折电位法、极谱法、液相色谱法、气相色谱法、离子色谱法等。

《中国药典》 通则3209羟胺残留量测定法 系依据在碱性要求下，羟胺与碘反应生成亚硝酸，然后与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，再与“萘胺联造成有色的偶氮化合物，遴荐紫外-可见分光光度法(通则0401)测定羟胺的含量，但存在贤人度低、打扰等问题，难以适用于低规章要求的检测。

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因羟胺在气相、液相中反映均较低，因此多遴荐滋生化方法来晋升贤人度，其中气相法多用丙酮、环己酮生成酮肟等；液相、液质方法多遴荐苯甲醛、对硝基苯甲醛滋生。

典型的分析要求如下：

（1）气相方法：用环己酮将盐酸羟胺滋生为环己酮肟，通过气相色谱进行测定。色谱柱为安捷伦DB-624色谱柱（30 m×0.53 mm,3μm）；检测器为氢火焰离子化检测器（FID），检测器的温度260℃；进样口温度为230℃；高纯氮气为载气，恒流方式，流速为1.5 ml/min；色谱柱的升温次第为：肇始温度55℃，看护2 min，以20℃/min的升温速度升温至95℃，看护2 min，再以40℃/min的升温速度升温至250℃，看护20 min。进样量为1μl；分流比为5:1。效果：盐酸羟胺在0.224 7～2.696μg/ml范围内，浓度与峰面积线性权衡考究（r=0.999 7）；平均回收率为99.24%～106.59%之间，RSD为2.29%。[1]

（2）液质方法：遴荐反相色谱，经苯甲醛滋生后以水-乙腈（0.1％甲酸）为流动相，梯度洗脱，流速0.3mL/min， 以ESI正离子多反应监测（MRM）方式进行检测。效果：盐酸羟胺的检测限和定量限可分辨达到0.2和0.4ng/mL，在线性范围内有考究的线性权衡（r=0.9987），准确度践诺低、中、高浓度回收率均在95.1%～ 109.2%，RSD为2.2%～6.4%，叠加性践诺６份加标样品溶液回收率的RSD为5.7%。[2]

（3）液相方法：HPLC 方法在 Sunfire C18 250 mm × 4.6 mm、5μm 色谱柱上诞生和优化，柱温箱温度保执在 40°C。 弃取磷酸盐缓冲液 （0.01M） pH 2.5 行为流动相 A，弃取乙腈行为梯度反相方式的流动相 B。色谱参数，即流速：1.5 ml/min，波长：254 nm，进样体积：20μl 和开动时辰：40 min。阐明考据数据，发现该方法具有特异性、贤人度、准确性和精密性。发现该杂质的既定检测限和定量限分辨为 1.7μg/g 和 5.0μg/g。在非布司他原料药中羟胺的 12 次测定中，在 4 个水平上得到的平均回收率为 101.6%。[3]

我院基因毒杂质商酌中心有多个原料药品种的羟胺残留分析方法商酌教会，在文件方法基础上优化了滋生要求，增强了方法的耐用性和准确度。

参考文件

[1]李彬,李丽婉.气相色谱法测定非布司他原料药中的基因毒性杂质盐酸羟胺[J].天津药学, 2024, 36(2):18-21.

[2]樊华军. 高效液相色谱-串联质谱法检测替格瑞洛原料药中的盐酸羟胺[J]. 药物分析杂志, 2022, 42(4): 709-713 https://doi.org/10.16155/j.0254-1793.2022.04.19

[3]Ramana S V , Raja K D , Babu K ,et al.Determination of Hydroxylamine by HPLC, a Mutagenic Impurity in Febuxostat Drug Substance[J]. 2018.

发布于：山东省